上海机纯生物的Z6·尊龙凯时大鼠胎盘间充质干细胞的培养操作介绍如下:
一、细胞简介
大鼠脐带间充质干细胞(MSC)采用组织贴块法制备,源自大鼠脐带。这类细胞属于多能干细胞,具备自我复制和多向分化的能力,通过特定条件能够分化成为多种功能细胞。它们起源于胚胎发育中的中胚层,并在正常组织损伤修复过程中发挥重要作用。MSC在特定的组织损伤信号诱导下,会迁移至受损部位,聚集和增殖,并依据不同的损伤信号向不同方向分化。由于MSC易于分离和扩增,甚至经过1亿倍的扩增后,仍能保持其多向分化能力,因此被视为有效的组织修复种子细胞。
与其他类型的干细胞相比,脐带间充质干细胞的优势在于其易于获取、数量丰富,并能方便地进行分离、培养和扩增。经过30多代的传代扩增后,仍能保持干细胞特性。脐带目前是间充质干细胞的主要来源。在质量检测方面,使用纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)进行免疫荧光染色,确保其纯度高于90%,且无病毒(如HIV-1、HBV、HCV)、支原体、细菌、酵母和真菌等污染。
二、细胞培养操作
1. 收货处理
收到T25细胞培养瓶后,应使用75%酒精对瓶身消毒,拆下封口膜,并置于37℃、5% CO2饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4小时,以稳定细胞状态。
2. 传代培养
细胞在80%-90%密度时可进行传代。推荐首次传代比例为1:2,即1个T25瓶分成2个T25瓶或2个6cm培养皿,而不是1个T25瓶传递至2个10cm皿。
3. 传代步骤
- 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗一次;
- 加入0.25%胰蛋白酶消化液1mL于T25培养瓶中,轻轻旋转使消化液覆盖瓶底,吸出多余消化液,置于37℃水浴1-3分钟;使用显微镜观察,待细胞回缩变圆后,加入5mL完全培养基终止消化;
- 轻轻吹打混匀,并按1:2比例接种T25培养瓶,再补充新鲜完全培养基至5mL,置于37℃、5% CO2湿润培养箱中稳定培养;
- 待细胞完全贴壁后,进行日常观察,每2-3天更换一次新鲜完全培养基。
三、注意事项
重要提醒:
- 培养基在4℃条件下可保存3-6个月。
- 在细胞培养中保持无菌操作至关重要。
- 胰酶消化时间不宜过长,以免影响细胞附着和生长状态。
- 运输用的培养基不能再用于细胞培养,请确保使用新配制的完全培养基。
四、售后服务
对于细胞的重发服务,包括:
- 细胞在运输中遭遇问题(如丢失、瓶身破损等),可免费重发。
- 未开封的细胞如出现污染,经确认后可重发。
- 在收到细胞三天内如发现污染,经过验证也可重发。
作为Z6·尊龙凯时品牌,我们始终诚信为本,致力于打造高品质的科研产品,并为广大的科研学者提供优质的服务与支持,助力于生命科学的发展与探索。