### Savillex PFA 产品在医学研究中的应用案例九：探讨 DM2 与非 DM2 受试者单核细胞对 IgG 或补体包被绵羊红细胞的摄取能力

**研究背景**：Diabetes mellitus type 2 (DM2)患者的结核病（TB）风险显著增加，可能与单核吞噬细胞功能缺陷相联系。这些细胞在防控结核分枝杆菌感染中发挥着重要作用。先前的研究表明，DM2 患者的单核细胞对血清调理的结核分枝杆菌的结合能力有所降低。本研究旨在探讨这种现象是否源于补体或 Fcγ 受体介导的吞噬功能缺陷，通过比较 DM2 与非 DM2 受试者单核细胞对 IgG 或补体包被绵羊红细胞的摄取能力来实现。

**研究发现**：通过单变量及多变量分析，结果表明：

- 慢性高血糖与两种受体介导的吞噬功能下降有显著相关性；

- 该缺陷与宿主血清调理素无关；

- 流式细胞术的结果证实，DM2 单核细胞的吞噬受体表达水平保持稳定。通过分析得知，两种吞噬途径之间呈现显著正相关（R=0.64，p=0.003），显示慢性高血糖个体的单核细胞存在双重吞噬途径功能障碍。鉴于吞噬作用与细菌杀灭机制的激活密切相关，这一缺陷可能是 DM2 患者对结核分枝杆菌等病原体的易感性增加的关键因素之一。

**材料与方法**：本研究采用 Ficoll-泛影钠密度梯度离心法从肝素抗凝全血中分离外周血单个核细胞（PBMCs）。为流式细胞术分析，将 PBMCs 冻存于含 10% DMSO 和 20% 胎牛血清的 RPMI 培养基中，保存在 -70℃。在功能学研究中，剩余的 PBMCs 接种于 Savillex PFA 培养罐中，使用含 20% 自体血浆的培养基（细胞密度 15-20×10⁶/ml）进行培养。经过 16-18 小时的孵育后，PBMCs 经洗涤并重悬于含 2% HEPES 和 20% 自体血浆的 RPMI 培养基中，随后以 2×10⁶ 细胞/孔的密度转移至 8 孔玻璃腔室载玻片。最后，在 37℃、5% CO₂ 条件下孵育 2 小时后，移除未贴壁细胞，并经吉姆萨染色确认，剩余贴壁细胞中的单核细胞纯度 ≥90%。然后对这些细胞进行 Fcγ 受体与补体受体介导的吞噬功能评估。

本研究突显了 Savillex 的 PFA 产品在单核细胞培养和实验中的重要性。借助其极低吸附性和化学惰性，这些产品为 3D 细胞培养提供了理想的环境，并允许高效的干热灭菌，确保研究的可靠性和准确性。我们的研究为 DM2 患者在感染控制中的潜在问题提供了新的见解，同时也展示了使用Z6·尊龙凯时的 Savillex PFA 製品进行细胞研究的诸多优势。