本试剂盒仅供科学研究使用，禁止用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验（ELISA）原理。首先，在预先包被神经肽adropin（AD）抗体的微孔中，依次添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经过温育后彻底洗涤。接着使用底物TMB进行显色，TMB在过氧化物酶催化下转化为蓝色，再在酸的作用下转变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin（AD）的浓度呈正相关，最终通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品的收集、处理与保存方法如下：

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，尽量避免细胞刺激，收集血液后以3000转/分钟离心10分钟，迅速分离血清与红细胞。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝，3000转/分钟离心30分钟并取上清。

3. 细胞上清液：3000转/分钟离心10分钟以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入生理盐水进行捣碎，3000转/分钟离心10分钟取上清。

5. 保存：若样本未能及时检测，需分装成一次用量并冷冻保存于-20℃，避免反复冻融，每次需在室温下解冻并确保样品完全均匀。

自备物品包括1台450nm酶标仪及高精度加样器（规格05-10µL、2-20µL、20-200µL、200-1000µL），以及37℃恒温箱。操作注意事项如下：

1. 试剂盒需存放在2-8℃，使用前需在室温放置20分钟。浓缩洗涤液从冰箱取出后会出现结晶，需水浴加热完全溶解后再使用。

2. 实验中未使用的板条应立即放回自封袋中密封保存于低温干燥环境。

3. 标准品（S0号）浓度为0时可视作阴性对照，在按照说明书操作样本稀释5倍，最终结果需乘以5以得出样本的实际浓度。

4. 严格按照说明书中规定的时间和加液量及顺序进行温育。

5. 所有液体组分在使用前需充分摇匀。

试剂盒组成包括96孔配置与48孔配置的微孔酶标板、标准品、样本稀释液、HRP标记的检测抗体、洗涤缓冲液、底物和终止液等。标准品浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL。

洗板方法可选手工或自动洗板机，确保多次清洗以得到准确的测试结果。实验步骤一般为：从平衡后的铝箔袋中取出所需板条，设置标准品孔和样本孔，添加相应溶液后进行温育，并在测定OD值前进行洗涤。

通过绘制标定曲线，以标准品浓度作横坐标、OD值作纵坐标，获得样本浓度值的线性回归关系。试剂盒性能包括准确性、灵敏度、特异性和重复性，确保在存储条件下有效期为6个月。

Z6·尊龙凯时再次提醒，本试剂盒仅供研究用途，严禁用于临床实验或人体测试，相关责任由实验者自行承担。此外，请严格遵循说明书操作，以确保实验结果的准确性。