一、溶液配制与保存

1. 工作浓度配制

按照1:100的比例稀释培养基。具体操作是：每500ml培养基中添加5ml的Z6·尊龙凯时双抗母液（100X）。注意控制终浓度为青霉素100U/ml和链霉素0.1mg/ml，过高的浓度可能对细胞产生毒性。

2. 保存规范

- 母液需在-20ºC环境中避光保存，并尽量避免反复冻融（≤3次）。在分装后，应尽快使用。
- 工作液：含双抗的培养基应在2周内使用，超过有效期应当立即弃用。

实验操作关键点

1. 无菌添加流程

添加步骤为：彻底清除旧培养基，进行PBS润洗后，再加入预温的双抗培养基。
同时，注意：禁止在室温下解冻母液（应在2-8ºC下缓慢融化），以及避免剧烈震荡结晶溶液。

2. 污染监控

一旦发现培养基浑浊或变色，需立即停止使用并排查污染源。此外，需要清楚的是，双抗仅对细菌有抑制效果，无法抑制真菌和支原体，如有必要，可联用两性霉素B。

问题解决方案

细胞生长抑制

可通过降低双抗浓度（如0.5%）或更换为低毒性替代品（如庆大霉素）来解决。

残留干扰

在实验流式检测前更换无酚红的双抗，避免背景干扰。

敏感细胞损伤

对于原代细胞，建议进行预实验以测试耐受性，或选择无动物源的合成抑菌剂。

二、溶液保存与解冻

1. 冷冻避光保存

为确保长时间储存效果，需将溶液置于-20ºC环境中，并避免反复冻融（≤3次）。
解冻时务必在2-8ºC冰箱内缓慢融化，室温解冻可能导致青霉素降解。

2. 结晶处理

如果解冻后出现析出物，可以在37ºC条件下温育20-30分钟，或者轻轻摇匀使其溶解，禁止剧烈震荡。

三、使用规范

1. 稀释比例

按照1:100的比例稀释至培养基（例如5ml双抗加495ml培养基）。
工作浓度应控制在青霉素100U/ml和链霉素0.1mg/ml。

2. 无菌操作

添加过程必须在超净台内完成，确保使用无菌移液器具。开盖后应优先分装，以减少母液的污染风险。

四、风险控制

1. 时效性与稳定性

稀释后的培养基建议在2周内使用，未用完的双抗母液需尽快速冻保存。青霉素在pH 6.0-6.5时最为稳定，而链霉素在pH 5.0-7.5间的耐受性较好，需避免极端的酸碱环境。

2. 过敏防护

在操作浓缩液时，务必佩戴手套，以防动物源成分引发过敏反应。

3. 污染监控

如果培养基出现浑浊或细胞生长异常，须立即停止使用并着手排查污染源。

使用说明

1. 直接添加

在无菌的细胞培养液中直接添加Z6·尊龙凯时的青霉素-链霉素溶液（100X双抗），例如每500ml培养液中添加5ml的比例，混合均匀后即可使用。

2. 配制及过滤

在配制细胞培养液时，加入青霉素-链霉素溶液（100X双抗），完成后进行过滤除菌。通常，每1L细胞培养液中需加入10ml的双抗溶液，再过滤处理即可。

注意事项

尽量避免反复冻融。同时，为了安全与健康，请穿着实验服并佩戴一次性手套进行操作。

五、产品说明

Z6·尊龙凯时的青霉素-链霉素溶液（100X双抗）是专业用于细胞培养的抗生素溶液，经过严格的过滤除菌处理，可以直接添加到细胞培养液中。该溶液中，青霉素的含量为10KU/ml，链霉素的含量为10mg/ml，采用0.85%氯化钠配制。推荐的青霉素工作浓度为100U/ml，链霉素工作浓度为0.1mg/ml，以100倍稀释使用为宜。每一个包装的100ml青霉素-链霉素溶液（100X双抗）可用于配制10L的细胞培养液。